提高池塘蓄水养蛏产量的三项关键技术

池塘蓄水养殖缢蛏具有生长快,养殖周期短,产量高,单位成本低等优点,是一种高产、高效、优质的养殖模式,严格掌握并有效地控制水质、饵料、底质三要素,是提高蓄水养蛏产量的关键。     

温度和盐度同缢蛏稚贝存活及生长的关系

本文阐述在室内控制的温度和盐度条件下，采用单因子和结合的方法，研究温度和盐度同缢蛏稚贝存活及生长的关系。缢蛏稚贝的适盐范围为4．50‰至28．30‰，最适盐度为12．40‰至16．30‰。在25℃时，它对低盐(1.80‰以下)有较强的忍耐性，对高盐度(33．50‰至40．00‰)也有一定的忍耐性。缢蛏稚贝的适温范围为10℃至35℃。但最适温度随盐度的不同而异，若在最适盐度的生境中，它的最适水温为27℃至30℃；如果稚贝在最适盐度以外的适盐范围内，经方差分析表明，它的最适温度是22℃。稚贝对低温(5℃至2℃)有很强的忍耐性，致死温度上限是40℃。缢蛏稚贝对盐度的敏感性，比它对温度的敏感性来得强。在22℃以下的温度组中和最适盐度范围内，盐度与温度的相关性不太明显；而在27℃以上的较高温度和适盐范围的上下极限时，其相关性显著，它们相应的适盐或适温范围明显地变窄。     

缢蛏消化盲囊的组织学与组织化学

运用光镜、透射电镜及组织化学方法研究了缢蛏消化盲囊的结构与功能。消化盲囊为复管泡状腺，以导管与胃腔相通。腺上皮由胚性细胞(E-细胞)、纤维细胞(F-细胞)、吸收细胞(R-细胞)和分泌细胞(B-细胞)组成，它们在分布位置、结构及功能等方面各有其特点：E-细胞主要存在于近端(与导管相连处)，体积较小、核质比大，能分化为其它类型的腺细胞；F-细胞内含发达的粗面内质网和游离核糖体，功能是合成、分泌消化酶；R-细胞以脂肪滴和糖原粒的形式储存丰富的能量；B-细胞只见于远端，游离端具发达的微绒毛，内含大量的次级溶酶体和消化残体，有很强的吸收和细胞内消化功能；B-细胞和R-细胞消化脂类的能力较强。导管壁由单层短柱状纤毛细胞和丰富的粘液细胞构成，纤毛柱状细胞能合成、分泌消化酶。消化盲囊参与无机盐代谢。     

9种金属离子对缢蛏消化酶活力的影响

以酶学分析的方法研究9种金属离子(Cu2+、Mg2+、Fe3+、Hg2+、Zn2+、Ca2+、Pb2+、Ag+和Mn2+)对缢蛏(Sinonovaculaconstricta)蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶活力的影响。缢蛏壳长(5 64±0 25)cm,9种金属离子浓度分别设置为2×10-6mol/L、2×10-5mol/L、2×10-4mol/L、2×10-3mol/L、2×10-2mol/L5个梯度。实验表明,缢蛏3种消化酶活力大小为淀粉酶>蛋白酶>纤维素酶;在实验设置的浓度范围内,Cu2+、Fe3+、Mg2+、Pb2+对蛋白酶活力影响不显著,Hg2+、Zn2+、Ca2+、Ag+、Mn2+对蛋白酶活力影响显著;Mg2+、Pb2+对淀粉酶活力影响不显著,Cu2+、Fe3+、Hg2+、Zn2+、Ca2+、Ag+、Mn2+对淀粉酶活力影响显著;Ca2+、Mg2+、Zn2+对纤维素酶活力影响不显著,Pb2+、Cu2+、Fe3+、Hg2+、Ag+、Mn2+对纤维素酶活力影响显著。不同浓度金属离子对缢蛏蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶活力的影响表现出不同的变化趋势。     

缢蛏家系生长与消化酶活性的比较

两次对6个缢蛏家系(A1、B1、C1、D1、E1和F1)生长性状(壳长、壳高、壳宽、总重和软体部重)进行测量、分析,并测定其体内淀粉酶活性和纤维素酶活性。发现缢蛏胃、消化盲囊等器官内淀粉酶活性较高,而纤维素酶的活性很低,消化酶活性与其滤食微藻的食性有关系。对比缢蛏生长性状的增长和消化酶活性的提升,结果表明家系D1的5个生长性状均取得最大值,且与家系A1、B1、C1、E1及F1存在显著差异(P0.05)。家系F1的5个生长性状均取得最小值,且各性状显著小于家系D1。随着日龄的增长,各个家系缢蛏个体的淀粉酶活性和纤维素酶活性都有所增长,2次的测量值显示同样的趋势,D1C1E1A1B1F1。发现缢蛏消化酶活性与生长发育相关,较快的生长速度对应较强的消化生理机能,高水平的消化酶活性有利于缢蛏对营养物质的消化吸收并转化为生长发育所需的能量。     

缢蛏IGFALS基因的表达特征及IGF系统对生长的调控作用

类胰岛素生长因子(insulin-like growth factor,IGF)信号通路在机体的发育、繁殖以及生长等过程中起着重要的调控作用。类胰岛素生长因子酸不稳定亚基(IGF acid-labile subunit,IGFALS)是IGF系统中的重要一员,可通过延长IGF的半衰期参与IGF信号通路的调控。本研究首次在缢蛏转录组数据库中筛选鉴定了两个IGFALS基因,包含完整的开放阅读框,分别命名为IGFALSa和IGFALSb。IGFALSa基因的cDNA序列为4809 bp,编码996个氨基酸;IGFALSb基因的cDNA序列为1925 bp,编码546个氨基酸。在缢蛏不同发育期的表达分析中发现,IGFALSa和IGFALSb在幼虫的前期发育阶段均只有少量表达,而随着幼虫的发育,其表达量逐渐上升;组织表达分析表明,IGFALSa在外套膜和性腺中高表达,IGFALSb则在水管中高表达。利用不同质量浓度胰岛素短期刺激缢蛏稚贝,当质量浓度为10 mg/L时,两个IGFALS基因表达量均显著上调,其下游基因IRS、PDK1、MPKP1的表达量也显著上调;进一步利用10 mg/L胰岛素长期喂养缢蛏稚贝,结果显示其壳长和壳宽的日生长率均显著提升。     

缢蛏微卫星多态性分析及其在亲子鉴定中的应用

利用磁珠富集法,构建了缢蛏(Sinonovacula constricta)微卫星富集文库。开发并筛选出18对微卫星引物,其中8对微卫星引物亲缘排除率较高,选取这8对引物对家系进行了亲子鉴定。结果表明,18对微卫星引物在12个个体中等位基因为2~6,平均等位基因为3.00;观测杂合度在0~1.000之间,平均值为0.581 3;期望杂合度0.290~0.779,平均值为0.528 4;多态信息含量为0.239~0.703,平均值为0.432 2。当两个亲本基因型未知时,8对微卫星引物在整个家系中单个亲本排除率(E-1P)为0.583~0.916,平均值为0.790 0;当一个亲本基因型已知时,另一个亲本的排除率(E-2P)为0.406~0.830,平均值为0.653 9。同时可知在子代个体数量不断增加的情况下,排除率仍在较高范围,因此可以作为亲子鉴定的分子标记。这对于缢蛏规范化养殖、家系选育的开展具有重要意义。     

缢蛏体形性状对活体重和肉重的影响效果分析

随机选取丹东东港市黄土坎镇沿海滩涂的缢蛏150只,测定其壳长(X1)、壳高(X2)、壳宽(X3)、活体重(Y)和肉重(Z),共5项性状。运用相关分析、通径分析,计算了以体形性状为自变量,重量性状为因变量的相关系数、通径系数、决定系数及相关指数,定量分析缢蛏体形性状对重量性状的影响效果。结果表明,3个体形性状对活体重和肉重(熟)的相关系数均达到极显著水平(P<0.01);3个性状对活体重的通径系数达到极显著水平(P<0.01);壳高和壳宽对肉重(熟)通径系数达到极显著水平(P<0.01),说明壳长、壳高和壳宽是影响活体重的主要因素;壳高和壳宽是影响肉重(熟)的主要因素。利用多元回归分析,剔除不显著性状,分别建立了体形性状对重量性状的回归方程:Y=-18.763+0.151 X1+0.698 X2+0.432 X3;Z=-7.997+0.293 X2+0.251 X3。以上体形性状对重量性状影响效果的分析结果为缢蛏遗传与育种提供了基础参考。     

溢油对贝类的毒害效应以及生态风险评价

通过磁力搅拌和超声波乳化等手段模拟海上溢油事故,采用常见的4种原油和4种燃料油开展对贝类的毒害效应以及生态风险评价。结果表明：根据8种油品对褶牡蛎的96h-LC50得出这8种油对褶牡蛎的整体上毒害作用的大小顺序是：F120=F180〉-20#〉F380〉TJ015〉TJ014〉TJ002〉TJ016;根据8种油品对缢蛏的96h-LC50得出这8种油对褶牡缢蛏蛎的整体上毒害作用的大小顺序是：F180〉F120〉-20#〉F380〉TJ002〉TJ015〉TJ014〉TJ016;根据8种油品对褶牡蛎的96h-LC50得出TJ016和TJ002对褶牡蛎属于低毒中风险,TJ015和TJ014对褶牡蛎属于低毒高风险,F380和-20#对褶牡蛎柴油属于中毒高风险,F180和F120对褶牡蛎属于高毒极高风险;根据8种油品对缢蛏的96h-LC50得出TJ016对缢蛏属于低毒中风险,TJ015、TJ014、TJ002和F380对缢蛏属于中毒高风险,-20#、F180和F120对缢蛏属于高毒极高风险。总之,对贝类而言,燃料油毒性比原油更大,缢蛏相对褶牡蛎对油品毒害作用更为敏感。     

缢蛏致病菌气单胞菌的分子生物学鉴定

从患病缢蛏（Sinvnovacula constricta）中分离到一株病原菌,暂命名为12#菌。对该菌株的16S rDNA的全序列进行PCR扩增并测序,然后用NCBIBLAST对测序结果进行比对。16S rDNA序列分析表明：12#菌与多株气单胞菌的16S rDNA的同源性均在95%以上。在细菌系统分类学中应归属于气单胞菌属。从构建的系统发育树中可以看出：12#菌与点状产气单胞菌（Aeromonas punctata）共同构成一个分支,且该菌株与点状产气单胞菌（Aeromonas punctata）的16S rDNA同源性达到99%以上,由此可以初步认为该菌为点状产气单胞菌（Aeromonas punctata）。